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アンギオテンシン受容体とアミロイドβタンパク質産生

鄒 鶤

岩手医科大学薬学部神経科学講座 ◇ 〒028–3694　岩手県紫波郡矢巾町西徳田2–1–1

1. はじめに

アルツハイマー病では大脳皮質の広範な神経細胞脱落が起こる．その原因はアミロイドβタンパク質（amyloid β-protein：Aβ）が重合し蓄積するためとされている．したがって，アルツハイマー病の予防・治療法の開発方針として，Aβの産生阻害や重合抑制などの治療戦略がとられている．Aβは，βセクレターゼおよびγセクレターゼによるアミロイド前駆体タンパク質から切断されて産生され，主にAβ40とAβ42の2種存在し，Aβ40 : Aβ42の比はほぼ10 : 1である．Aβ42は凝集しやすく，毒性が高いことから，アルツハイマー病の原因分子だと考えられている．一方，高血圧はアルツハイマー病あるいは認知症の危険因子として報告され，特に中年期の高血圧はアルツハイマー病発症との関連が深い．レニン・アンギオテンシン系は重要な血圧調節機構として100年以上前に発見され，現在も基礎から大規模臨床試験まで幅広い研究が行われている．アンギオテンシン受容体ブロッカー（angiotensin receptor blocker：ARB）やアンギオテンシン変換酵素阻害剤をはじめとするレニン・アンギオテンシン系の阻害薬は，高血圧の治療に応用されている．臨床疫学研究ではARB投与が認知障害の発症を抑制するという結果が報告されている．一方，筆者らの研究から，いくつかのARBがAβの産生に影響を与えることが明らかとなった．さらに，筆者らは，アンギオテンシン受容体タイプIa（angiotensin receptor type Ia：AT1a）欠損のアルツハイマー病モデルマウスにおいて，Aβ産生および脳内のAβ蓄積が減少していることを見いだした．ヒトでは，マウスAT1aに相当するAT1は，血圧調節に中心的な役割を担っており，高血圧治療のためにARBが臨床に広く用いられている．本稿では，Aβ産生および脳内のAβ蓄積におけるAT1の関与について考察したい．

2. アルツハイマー病とARB

アルツハイマー病は，認知症の原因の約60％を占める進行性の神経変性疾患である．アルツハイマー病の病理学上の特徴は，老人斑と神経原線維変化を伴う神経細胞脱落である．老人斑はAβからなり，Aβがアミロイド前駆体タンパク質からβセクレターゼおよびγセクレターゼにより切り出される．アルツハイマー病の発症機序には，Aβの凝集・沈着が引き金となって，神経原線維変化，神経細胞脱落，ひいては認知症を引き起こすというアミロイドカスケード仮説が最も有力視されている1）．

近年の疫学研究では，アルツハイマー病の発症は血圧調節と関連していることが明らかとなってきた．特に中年期の高血圧はアルツハイマー病の主な危険因子の一つであり，中年期の高血圧が起因しているアルツハイマー病患者は全体の約5％を占めている．一方，晩年期の低血圧，あるいは降圧剤を服用している低血圧患者はアルツハイマー病を発症しやすいことが報告されている2–4）．レニン・アンギオテンシン系は，血圧と体液恒常性を調節するきわめて重要な内分泌系である．レニンは，アンギオテンシンノーゲンのN末端から10個のアミノ酸であるアンギオテンシンIを切り出す．アンギオテンシンIは，アンギオテンシン変換酵素によって，C末端から2個のアミノ酸が切り出されて8個のアミノ酸であるアンギオテンシンIIになる．アンギオテンシンIIは，AT1を介して血管収縮やアルドステロン分泌を引き起こし，血圧を制御している．脳内では独自のレニン・アンギオテンシン系が存在し，記憶，ストレス，脳血流，渇き感などを制御している5）．興味深いことに，アンギオテンシンIIは，学習能力と記憶を阻害することが報告されている．一方，アンギオテンシンIVは，アンギオテンシン受容体タイプ4（angiotensin receptor type 4：AT4）を介して記憶の獲得と定着を促進している6）．これらの知見は，アルツハイマー病の発症にAT1が何らかのメカニズムで関与している可能性を示唆している．

2007年にWangらは，ARBであるvalsartanがAβ42の凝集を阻害し，アルツハイマー病モデルマウスのAβ沈着や記憶を改善したことを報告した7）．2010年にDanielyanらは，losartanが抗炎症作用を持ち，Aβ沈着を減らしたことを見いだしている8）．さらに，ARBを服用している高血圧の患者は，アルツハイマー病の発症リスクが低くなることも報告されている9）．しかし，これらのARBの作用が，Aβ産生・代謝へ影響を与えるのか否か，その分子機序を含め不明である．筆者らは，ARBがAβ産生を抑制するではないかと予想したが，興味深いことに，ARBが種類によってAβ産生を促進する作用を持つことが明らかとなった（図1）．筆者らは，まず，活性型ARBであるtelmisartanとvalsartanが，Aβ産生において異なる作用を持つことを示した．valsartanはAβ産生に影響を示さないが，telmisartanはAβ40とAβ42の産生をそれぞれ約6倍，3倍に増強した．また，非活性型のlosartan, candesartanおよびolmesartanのうち，olmesartanのみがAβ産生促進作用を示し，特にAβ42の産生を約3倍増強した（表1）．筆者らはさらに，AT1のシグナル伝達系を阻害剤を用いてスクリーニングし，telmisartanのAβ産生増強作用がPI3キナーゼの阻害剤wortmanninにより顕著に阻害されることを見いだした．また，PI3キナーゼ下流のAktのリン酸化もtelmisartan処理により増強されることも明らかとなった（図1）．これらのシグナル活性化は，アンギオテンシンIIとその受容体AT1のシグナル伝達に類似している．また，AT1aの欠損細胞では，telmisartanがAβ産生の増強作用を示さなかった．これらの結果は，telmisartanやolmesartanがAT1と結合し，PI3キナーゼおよびAktのリン酸化を介してAβ産生を促進することを示唆した．本研究で使用したARBとAT1との結合の強さは，telmisartan＞olmesartan＞candesartan＞valsartan≥losartanの順に報告されており（表1），ARBとAT1との強い結合がアンギオテンシンIIシグナルを抑制できる一方，AT1の一部のシグナル伝達を活性化する可能性が示唆される10）．

図1 telmisartanのAβ産生増強作用

3. AT1とAβ産生

最近の研究によると，アンギオテンシンIIは，学習能力と記憶を阻害することが明らかにされている．Ducheminらは，マウスの皮下に浸透性ポンプによりアンギオテンシンIIを慢性的に投与し，高血圧や空間記憶障害を生じたことを報告した11）．また，Totaらによると，ラットの脳室に急性的にアンギオテンシンIIを注射したところ，やはり記憶障害を観察している．アンギオテンシンIIの投与に伴い，脳血流およびアセチルコリンの減少や酸化ストレスの増加などが確認された12）．一方，我々の結果から，telmisartanのAT1刺激によりAβ産生が増強され，脳内のAβ沈着がAT1により制御されている可能性が示唆された．

そこで，筆者らは，まず，アンギオテンシンIIがAβ産生を促進するか否かを検討した．telmisartanのAβ産生増強作用より弱いが，アンギオテンシンIIにも確かにAβ40およびAβ42の産生増強作用がみられた（図2A）．マウスでは，AT1aとAT1bの2種類の遺伝子アイソフォームがあり，アンギオテンシンIIのシグナル伝達は，ほとんどAT1aを介している．次に，筆者らは，AT1aがAβの産生・沈着にどのように影響を与えるのかを検討するため，AT1a欠損のアルツハイマー病モデルマウスを作製し，Aβ沈着の変化を検討した．thioflavin-S染色の結果，AT1a欠損マウスは脳内におけるAβ沈着が明らかに減少している（図2B）．thioflavin-Sは，コンパクトなアミロイド沈着のβシート構造に結合し，アミロイドを可視化している．筆者らが使用したアルツハイマー病モデルマウスでは，沈着したAβのほとんどがAβ42であり，Aβ40はごく少量しか検出されないため，これらのコンパクトなアミロイドはAβ42の沈着と考えられる．Aβ42の免疫染色の結果，やはりAβ42の沈着がAT1a欠損マウスでは明らかに減少していた．さらに，AT1a欠損APPマウスの初代培養線維芽細胞では，Aβ産生が著しく減少したことを見いだした（図2C）．このことは，Aβ産生に関わるβセクレターゼ，あるいはγセクレターゼ複合体の活性の変化を意味している．プレセリン1は，N末端フラグメント（N-terminal fragment：NTF）とC末端フラグメント（C-terminal fragment：CTF）に切断されてからγセクレターゼの活性を持つようになり，γセクレターゼ複合体の中で中心的な役割を担っている．興味深いことに，AT1a欠損マウス脳内のプレセニリン1の全長が増え，切断されたプレセニリンCTFが減少していることがわかった．それに伴い，γセクレターゼ複合体の構成分子のニカストリン（Nicastrin：NCT），Aph-1およびPen-2のタンパク質量も減少した（図2D）．このことは，AT1欠損がγセクレターゼ複合体の量を低下させ，Aβ産生を阻害することを示唆するものである．筆者らは，これらの分子機序を詳しく検討した結果，telmisartanのシグナル伝達と同様にアンギオテンシンIIが，AT1, PI3K, Aktを介してプレセニリン1の切断を促進し，さらにγセクレターゼ複合体形成を促進することを明らかにした（図3）13）．最近の疫学研究によると，ARBがヒトのAβ沈着やtauタンパク質の量を減少させることが明らかにされている14）．これらの結果も，AT1欠損がAβ産生を抑制するという筆者らの結果とよく一致している．しかし，ARBは種類によってAβ産生を増強させるものもあり，さらに種類別にAβ沈着やアルツハイマー病の発症への影響を詳しく調査する必要があると思われる．

図2 AT1a欠損APPマウスおけるAβ沈着の減少

図3 AT1aの活性化によるAβ産生の促進

4. Aβ産生に及ぼすGタンパク質共役型受容体の多彩な影響

これまでの研究では，さまざまなGタンパク質共役型受容体（GPCR）がアミロイド前駆体タンパク質の代謝やAβの産生に関わっていることが明らかにされている15）．まず，分泌型APPの産生に影響するGPCRが複数報告されている．分泌型アミロイド前駆体タンパク質は，αセクレターゼにより切断されて産生され，Aβの産生量と逆相関している．ムスカリン性アセチルコリン受容体のM1とM3の刺激が分泌型アミロイド前駆体タンパク質を増加させ，結果としてAβ産生を抑制することが報告されている．また，代謝型グルタミン酸受容体（metabotropic glutamate receptor：mGluR）は，アミロイド前駆体タンパク質の代謝に異なる作用を示している．グループIに属するmGluR1とmGluR5の刺激は，分泌型アミロイド前駆体タンパク質の産生およびAβ凝集抑制作用を持つAβ40の産生を促進している．一方，グループIIに属するmGluR2とmGluR3の刺激は，凝集性の高いAβ42を増加している．さらに，一部のセロトニン受容体（5-hydroxytryptamine receptor：5-HTR），5-HT₂Rと5-HT₄Rの活性化は，分泌型アミロイド前駆体タンパク質の増加およびAβ産生の減少をもたらしている．また，5-HT₆Rに結合する阻害剤は加齢ラットの記憶を改善する作用を示し，第II相臨床試験ではアルツハイマー病患者の認知能を改善する効果がみられた．この阻害剤の認知能改善の作用機序は，Aβ産生と無関係で，アセチルコリンの放出増強であると考えられている15）．

さらに，Aβ産生に直接関わっているβセクレターゼとγセクレターゼの活性を促進するGPCRが存在する．たとえば，δオピオイド受容体（δ-opioid receptor：DOR）はβセクレターゼやγセクレターゼの細胞内への移動を促進し，それらの活性を増強している．β₂アドレナリン受容体（β₂-adrenergic receptor：β₂-AR）およびGPCR3はγセクレターゼの活性を促進し，Aβ40およびAβ42の産生を増強している15）．これらの結果は，筆者らが報告したAT1の作用とよく一致している．GPCRを標的とする作動薬や拮抗薬は，薬品の中では最も大きい割合を占めている．既存のGPCR標的薬から，アルツハイマー病に対する治療・予防薬が見いだされる可能性が十分あると考えられる．AT1の阻害薬ARBの中から，降圧効果以外にAβ産生に対する，特にAβ42産生に対する抑制薬の発見が期待される．

本稿で紹介した筆者らの研究は，岩手医科大学薬学部神経科学講座で行われ，多くの実験は劉俊俊博士によって行われました．また，本研究の推進に際して多大な支援をいただきました岩手医科大学薬学部神経科学講座の駒野宏人教授および名古屋市立大学医学部病態生化学講座の道川誠教授に深く感謝を申し上げます．これらの研究は，科学研究費補助金，私立大学戦略的研究基盤形成支援事業等の支援を受けて行われました．

1) Ballard, C., Gauthier, S., Corbett, A., Brayne, C., Aarsland, D., & Jones, E. (2011) Lancet, 377, 1019–1031.

2) Barnes, D.E. & Yaffe, K. (2011) Lancet Neurol., 10, 819–828.

3) Kennelly, S.P., Lawlor, B.A., & Kenny, R.A. (2009) Ageing Res. Rev., 8, 61–70.

4) Mayeux, R. & Stern, Y. (2012) Cold Spring Harb. Perspect. Med., 2, a006239.

5) Wright, J.W. & Harding, J.W. (2013) Pflugers Arch., 465, 133–151.

6) Wright, J.W., Kawas, L.H., & Harding, J.W. (2013) Front. Endocrinol. (Lausanne), 4, 158.

7) Wang, J., Ho, L., Chen, L., Zhao, Z., Zhao, W., Qian, X., Humala, N., Seror, I., Bartholomew, S., Rosendorff, C., & Pasinetti, G.M. (2007) J. Clin. Invest., 117, 3393–3402.

8) Danielyan, L., Klein, R., Hanson, L.R., Buadze, M., Schwab, M., Gleiter, C.H., & Frey, W.H. II. (2010) Rejuvenation Res., 13, 195–201.

9) Davies, N.M., Kehoe, P.G., Ben-Shlomo, Y., & Martin, R.M. (2011) J. Alzheimers Dis., 26, 699–708.

10) Liu, J., Liu, S., Tanabe, C., Maeda, T., Zou, K., & Komano, H. (2014) Neurosci. Lett., 567, 51–56.

11) Duchemin, S., Belanger, E., Wu, R., Ferland, G., & Girouard, H. (2013) Physiol. Behav., 109, 63–68.

12) Tota, S., Goel, R., Pachauri, S.D., Rajasekar, N., Najmi, A.K., Hanif, K., & Nath, C. (2013) Psychopharmacology (Berl.), 226, 357–369.

13) Liu, J., Liu, S., Matsumoto, Y., Murakami, S., Sugakawa, Y., Kami, A., Tanabe, C., Maeda, T., Michikawa, M., Komano, H., & Zou, K. (2015) Sci. Rep., 5, 12059.

14) Hajjar, I. & Levey, A. (2015) JAMA Neurol., 72, 1069–1070.

15) Thathiah, A. & De Strooper, B. (2011) Nat. Rev. Neurosci., 12, 73–87.

鄒 鶤

岩手医科大学特任講師（薬学部）．博士（医学）．

略歴 ◇ 1995年中国大連医科大学医学部卒業．2001名古屋大学大学院医学研究科博士後期課程修了．同年国立長寿医療センターリサーチ・レジデント．03年米国スタンフォード大学医学部博士研究員．04年国立長寿医療センター日本学術振興会特別研究員．07年岩手医科大学薬学部神経科学講座助手．09年助教．12年より現職．

研究テーマと抱負 ◇ 現在，レニン・アンギオテンシン系とアルツハイマー病発症との関連を研究している．アルツハイマー病の予防，早期診断および治療法を開発したい．

趣味 ◇ スポーツ観戦，アウトドア．